Ponorná metóda mikroskopického pozorovania zahŕňa zavedenie špeciálnej tekutiny medzi šošovku prístroja a skúmaný objekt. Zvyšuje jas a rozširuje rozsah zväčšenia obrazu. Objekt tak možno výrazne priblížiť a preskúmať jeho najmenšie prvky bez výmeny vybavenia. Podľa toho sa kvapalina nazýva ponorenie. Môže slúžiť ako rôzne kompozície. Najpopulárnejší je imerzný olej. Zvážte jeho vlastnosti podrobnejšie.
Všeobecné informácie
Prvým imerzným olejom pre mikroskopiu bol céder. Malo to však jednu významnú nevýhodu. Postupom času sa jeho vlastnosti zmenili a neumožňovali dosiahnuť požadované výsledky. Na čerstvom vzduchu začala kvapalina postupne kondenzovať (až do vytvrdnutia). V súlade s tým sa zmenil aj index lomu. V 20. storočí sa začal vyrábať syntetický imerzný olej. Táto tekutina nemala vyššie uvedený nedostatok.
Normy pre ponorný olej
Kľúčparametre kvapaliny sú stanovené v GOST 13739-78. Imerzný olej má podľa normy:
- index lomu nd=1,515±0,001;
- priepustnosť v spektrálnom rozsahu od 500 do 700 nm s hrúbkou vrstvy 1 mm - 95%, od 400 do 480 nm - 92%;
Optimálna teplota, pri ktorej je možné použiť imerzný olej, je 20 stupňov. Existujú aj medzinárodné normy. Podľa ISO 8036/1 je index lomu 1,518 + 0,0005 a priepustnosť pri 10 mm vrstve pre spektrálny rozsah od 500 do 760 nm je 95 % a pri 400 nm je 60 %.
Uvedené parametre zodpovedajú nefluorescenčnému imerznému oleju. Norma ISO 8036-1/2 definuje vlastnosti kvapaliny pre luminiscenciu. Priepustnosť v spektrálnom rozsahu od 500 do 700 nm vo vrstve 10 mm je 95%, od 365 do 400 nm - 60%.
Problémy s nezrovnalosťami parametrov
Identifikovateľný rozdiel vo vyššie uvedených normách môže mať za následok zhoršenie výkonu konkrétnej šošovky pri použití nevhodnej kvapaliny. Výsledok:
- Kontrast je znížený v dôsledku sférickej aberácie.
- Pole na výskumnom objekte je farebné.
- Osvetlenie v rovine skúmaného objektu a v oblasti jeho tvorby obrazu je nerovnomerné.
- Obrázok bude rozmazaný.
Nuance
Optické mikroskopy majú hornú hranicu rozlíšeniao niečo viac ako 100-krát. Pri tejto úrovni zväčšenia by malo byť osvetlenie skúmaného objektu vysoko kvalitné. V opačnom prípade bude výsledný obrázok taký tmavý, že objekt nebude možné vidieť. Faktom je, že medzi krycím sklom a objektívom dochádza k lomu a rozptylu svetla. K jej väčšiemu zachyteniu prispieva imerzný olej. Výsledkom je, že obraz bude jasnejší.
Vlastnosti lomu svetla
Ako získate jasný obraz? V rôznych médiách dochádza k lomu svetla rôznymi spôsobmi. Napríklad uhly lomu lúčov vo vzduchu a skle sú rôzne. V prvom prípade je indikátor 1,0, v druhom - 1,5. Toto je hlavný problém.
Použitie oleja vám umožňuje znížiť index lomu lúčov, ktoré prechádzajú skúmaným objektom. Faktom je, že kvapalina má rovnaký parameter ako sklo. V dôsledku toho sa medzi sklíčkom a šošovkou vytvorí homogénne médium a väčšina svetla prechádzajúceho objektom sa dostane do prístroja. Výsledkom je jasný obraz.
Technické body
Tubusy ponorných šošoviek sú spravidla gravírované olejom. Samotný prvok sa používa, keď je potrebná clona 1,0 alebo viac. Takéto "ponorné" šošovky sa používajú na priame ponorenie do kvapaliny. V tomto ohľade sú úplne utesnené. To poskytuje vysokú ochranu pred poškodením šošoviek olejom.
Klasifikácia
Oleje sa používajú v praxidve viskozity: vysoká (typ B) a nízka (A). Na obale často nájdete informácie o indexe lomu. Vyrábajú napríklad imerzný olej (100 ml), ktorého index lomu je 1,515. Kvapaliny s nízkou viskozitou sa aplikujú do vzduchového priestoru a s vysokou viskozitou - spolu s kondenzátormi.
Podmienky používania
Ak chcete získať jasnú predstavu o skúmanom objekte, musíte postupovať podľa pomerne jednoduchých odporúčaní:
- Nájdite skúmaný objekt na posúvači v strede poľa pri malom zvýšení. Na tento účel sa používa šošovka s malým zväčšením.
- Otočte vežou.
- Uveďte šošovku 100x do pracovnej polohy.
- Položte kvapku oleja na sklíčko, druhú na šošovku.
- Upravte pracovnú vzdialenosť jemným zaostrovaním, kým nebude objekt jasne viditeľný.
Pri práci si treba dávať pozor. Je dôležité zabrániť vniknutiu vzduchu medzi krycie sklíčko a objektív.
Imerzný olej „Minimed“
Kvapalina sa používa pri práci s achromatickými a apochromatickými šošovkami akéhokoľvek typu zariadení, okrem luminiscenčných. Podľa odborníkov, ktorí tento imerzný olej používali, má niekoľko užitočných vlastností. Kvapalina výrazne zlepšuje viditeľnosť objektu, minimalizuje odlesky, straty svetla a optické aberácie. Použitie oleja výrazne rozširuje rozsah možností vybavenia.
Čistenievybavenie
Po práci s imerzným olejom je potrebné dať prístroj do poriadku. Čistenie by sa malo vykonať pred zaschnutím šošovky. Čistý papier na šošovky sa používa na odstránenie zvyškov oleja. Na čistenie všetkých sklenených plôch sa používa zrolovaný plech. Papier na šošovky by sa mal navlhčiť roztokom na šošovky a mal by sa odstrániť všetok zvyšný olej.
Historické pozadie
Prvým vedcom, ktorý vysvetlil mechanizmus imerzie, bol Robert Hooke. V roku 1678 vyšla jeho kniha Microscopium, v ktorej boli uvedené všetky vysvetlenia. V roku 1812 bolo navrhnuté ponorenie ako prostriedok na korekciu aberácií šošovky. Autorom myšlienky bol David Buster. Okolo roku 1840 boli vyrobené prvé imerzné šošovky. Ich tvorcom bol D. B. Amici. Spočiatku výskumníci používali ako imerznú kvapalinu anízové oleje. Index lomu bol blízky indexu lomu skla.
