Pojem „mikroskopia“má grécke korene. V preklade to znamená štúdium objektov pomocou vysoko presných prístrojov. Fluorescencia a elektrónová mikroskopia sú v poslednej dobe čoraz populárnejšie.
Rozlíšenie
Pod ním spravidla rozumejú minimálnu vzdialenosť, na ktorú možno umiestniť jasne rozlíšiteľné predmety. Stupeň prieniku do mikroskopického sveta, schopnosť zvážiť veľkosť skúmaného prvku bude závisieť od rozlíšenia zariadenia. Pri veľkom zväčšení sa môžu hranice objektov zlúčiť. V súlade s tým existujú určité hranice, za ktorými je aproximácia prvkov bezvýznamná.
Metóda luminiscenčnej mikroskopie: mechanizmus
Keď sa energia absorbovaná látkou premení na viditeľné žiarenie, vznikne žiara. Nazýva sa to luminiscencia. Tento jav je spôsobený tým, že niektoré látky pod vplyvom svetla začnú vyžarovať lúče s inou (zvyčajne veľkou) vlnovou dĺžkou. Navyše niektoré predmety, ktoré pri bežnom osvetlení majú istfarbu, vplyvom ultrafialového žiarenia zmenia svoju farbu.
Specific
Predmet, ktorý nie je možné vidieť pod ultrafialovým svetlom, môže vyžarovať jasný lesk, ak je ošetrený špeciálnou látkou. Živly v ňom v tme žiaria rôznymi farbami. Sila žiarenia je rôzna, ale spravidla je malá. V tomto ohľade je fluorescenčná mikroskopia účinná v zatemnenej miestnosti. Pri použití tohto typu štúdia sa objekt pozerá vo svetle, ktoré sám vyžaruje. Chemické zloženie tkanív, buniek ovplyvní kvalitu štúdie. Fluorescenčná mikroskopia sa do určitej miery považuje za histochemickú štúdiu.
Klasifikácia
Fluorescenčná mikroskopia môže byť primárna alebo sekundárna. V druhom prípade je objekt spracovaný špeciálnymi zlúčeninami, ktoré dodávajú žiaru. Primárna fluorescenčná mikroskopia je založená na vlastnej schopnosti prvku vyžarovať svetlo.
Vybavenie
Fluorescenčná mikroskopia sa vykonáva pomocou rôznych zariadení. Ich hlavným prvkom je iluminátor. Je vybavená UV lampou. Okrem toho zariadenia používajú sadu filtrov. V niektorých zariadeniach existuje pomerne veľa rôznych konfigurácií. V závislosti od toho, ktorá farba sa používa na vybudenie luminiscencie – ultrafialová alebo modrá, sa medzi zdroj svetla a skúmaný objekt umiestni príslušný filter. Keďže žiara mikroskopického prvku je energeticky slabšia ako vzrušujúce svetlo, bude zachytená iba za jednej podmienky. Prebytočné lúče zo zdroja musia byť odrezané žltozeleným filtrom. Nachádza sa na okuláre prístroja. Najvýraznejší efekt luminiscencie bude, keď filter úplne odreže lúče vychádzajúce zo zdroja svetla.
Z čoho pozostáva inštalácia viditeľného svetla? Obsahuje zdroj jasného svetla a biologický mikroskop. Medzi zrkadlom prístroja a lampou je umiestnený modrofialový filter. Môže to byť FS-1, UFS-3 a tak ďalej. Žltý filter sa nasadí na okulár mikroskopu. S ich pomocou dopadá na objekt modrofialové svetlo. Vyvoláva luminiscenciu. Ale toto svetlo môže rušiť videnie žiary. Preto je na ceste k oku odrezaný žltým filtrom. Osvetlenie je nastavené podľa Koehlerovho spôsobu s jednou výnimkou. Membrána kondenzátora musí byť úplne otvorená. Pri vyšetrovaní je dôležité použiť nefluorescenčný imerzný olej. Na zníženie vlastnej žiary sa do nej pridáva nitrobenzén (2-10 kvapiek / 1 g).
Luminiscenčná mikroskopia: aplikácie v mikrobiológii
Výhody tohto typu štúdia sú:
- Možnosť farebného zobrazovania.
- Vysoko kontrastné samovyžarujúce prvky na čiernom pozadí.
- Detekcia a lokalizácia určitých typov vírusov a mikróbov.
- Schopnosť študovať transparentne a nepriehľadneživé organizmy.
- Štúdium životných procesov v ich dynamike.
Tiež treba povedať, že luminiscenčná mikroskopia prispieva k rozvoju najlepších metód histo- a cytochémie, expresnej diagnostiky.
